PV-6001 / 6002 / 6003
Two-Step IHC Detection Reagent
二步法免疫组化检测试剂
简介
非生物素二步法免疫组化检测试剂利用某些单体有机小分子将小鼠(PV-6002)/兔(PV-6001)/山羊(PV-6003)的免疫球蛋白与过氧化物酶联结成多聚体形式,使每一个抗体分子与多个酶分子相连,替代传统方法中的二抗和三抗,直接放大抗原抗体结合的信号,可以将位于人和动物的组织切片和细胞涂片上的抗原进行定位。与传统的SP三步法相比,此试剂盒具有简单、快速、敏感等特点,因为系统中不再使用生物素,所以避免了由于内源性生物素所造成的背景染色。
免疫染色步骤(所有的步骤均需在室温条件下完成)
1、脱蜡、水化组织切片。
2、根据所应用的一抗的特殊要求,对组织切片进行预处理。
3、3%H2O2去离子水孵育5-10分钟,阻断内源性过氧化物酶。PBS或TBS冲洗,2分钟×3次。
4、滴加一抗,37度孵育1-2小时或4度冰箱过夜,PBS或TBS冲洗,2分钟×3次。
5、按照一抗的来源,分别滴加相应的检测试剂:
PV-6001 山羊抗或兔IgG抗体-HRP多聚体
PV-6002 山羊抗小鼠IgG抗体-HRP多聚体
PV-6003 兔抗山羊IgG抗体-HRP多聚体
室温或37度孵育30分钟,PBS或TBS冲洗,2分钟×3次。
6、选用DAB或AEC显色。
7、蒸馏水或自来水充分冲洗。
8、如果需要,可进行复染、脱水、透明。
9、选择适当的封片剂进行封片。